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食品_急性毒性試驗(yàn)的含義和實(shí)驗(yàn)原理

文章來(lái)源：華道顧問(wèn) 編輯：華道顧問(wèn)

         急性毒性是指機(jī)體(人或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物)一次(或24小時(shí)內(nèi)多次)接觸外來(lái)化合物之后所引起的中毒效應(yīng)，甚至引起死亡。但須指出化合物使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生中毒效應(yīng)的快慢和劇烈的程度，可因所接觸的化合物的質(zhì)與量不同而異。有的化合物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接觸致死劑量的幾分鐘之內(nèi)，就可發(fā)生中毒癥狀，甚至死亡。而有的化合物則在幾天后才顯現(xiàn)中毒癥狀和死亡，即遲發(fā)死亡。此外，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接觸化合物的方式或途徑不同，“一次”的含義也有所不同。凡經(jīng)口接觸和各種方式的注射接觸，“一次”是指在瞬間將受試化合物輸入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體內(nèi)。而經(jīng)呼吸道吸入與經(jīng)皮膚接觸，“一次”是指在一個(gè)特定的期間內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物持續(xù)地接觸受試化合物的過(guò)程，所以“一次”含有時(shí)間因素。
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.求出受試化合物對(duì)一種或幾種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的致死劑量(通常以LD50為主要參數(shù))，以初步估計(jì)該化合物對(duì)人類毒害的危險(xiǎn)性。
2.闡明受試化合物急性毒性的劑量－反應(yīng)關(guān)系與中毒特征。
3.利用急性毒性試驗(yàn)方法研究化合物在機(jī)體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)運(yùn)和生物轉(zhuǎn)化過(guò)程及其動(dòng)力學(xué)變化。也可用于研究急救治療措施。
二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和染毒方法
(一) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
在衛(wèi)生毒理學(xué)領(lǐng)域中，體內(nèi)試驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為研究對(duì)象，最終是為了闡明受試外來(lái)化合物對(duì)人的急性危害性質(zhì)和危害強(qiáng)度。所以選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，要求在其接觸化合物之后的毒性反應(yīng)，應(yīng)當(dāng)與人接觸該化合物的毒性反應(yīng)基本一致，雖然利用任何一種或幾種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的急性毒性結(jié)果向人外推都必須十分慎重，但這一選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則仍非常重要。
1.物種選擇以選擇哺乳動(dòng)物為主。目前實(shí)際應(yīng)用中以大鼠和小鼠為主，尤以大鼠使用很多。需指出大鼠并非對(duì)外來(lái)化合物都最敏丅感。家兔常用于研究化合物的皮膚毒性，包括對(duì)粘膜的刺激。貓、狗也用于急性毒性試驗(yàn)，但因價(jià)貴不易于大量使用。豬為雜食動(dòng)物，對(duì)一些化合物的生物效應(yīng)表現(xiàn)與人有相似之處，尤其是皮膚結(jié)構(gòu)與人較近似。但因體大、價(jià)貴，不便大量使用。
歸納起來(lái)，在進(jìn)行化合物急性毒性研究中，選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原則是：盡量選擇對(duì)化合物毒性反應(yīng)與人近似的動(dòng)物；易于飼養(yǎng)管理，試驗(yàn)操作方便；易于獲得、品系純化，且價(jià)格較低的動(dòng)物。為了有利于預(yù)測(cè)化合物對(duì)人的危害，要求選擇兩種以上的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，最好一種為嚙齒類，一種為非嚙齒類，分別求出其急性毒性參數(shù)。
一般研究外來(lái)化合物急性毒性，需雌雄兩性動(dòng)物同時(shí)分別進(jìn)行，每個(gè)劑量組兩性動(dòng)物數(shù)相等。急性毒性使用小鼠體重以18~25g、大鼠180~240g、豚鼠200~250g、家兔2~2.5kg、貓1.5~2.0kg左右為宜。
(二) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物喂養(yǎng)環(huán)境
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物喂養(yǎng)室室溫應(yīng)控制在22±3℃，家兔可控制在20±3℃，相對(duì)濕度30%～73%，無(wú)對(duì)流風(fēng)。每籠動(dòng)物數(shù)以不干擾動(dòng)物個(gè)體活動(dòng)及不影響試驗(yàn)觀察為度，必要時(shí)需單籠飼養(yǎng)。飼養(yǎng)室采用人工晝夜為好，早6點(diǎn)至晚6點(diǎn)進(jìn)行12小時(shí)光照，其余12小時(shí)黑暗，一般食用常規(guī)試驗(yàn)室飼料，自由飲水。
(三) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒方法
1.經(jīng)口(胃腸道)接觸目的是研究外來(lái)化合物能否經(jīng)胃腸道吸收及求出經(jīng)口接觸的致死劑量(LD50)等。由于外來(lái)化合物可以污染飲水及食物，因此，此種染毒方式在衛(wèi)生毒理學(xué)中占有重要地位。
(1) 灌胃是將液態(tài)受試化合物或固態(tài)、氣態(tài)化合物溶于某種溶劑中，配制成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經(jīng)過(guò)導(dǎo)管注入胃內(nèi)。
在每一試驗(yàn)系列中，同物種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌胃體積最好一致，即以單位體重計(jì)算所給予的毫升數(shù)應(yīng)一致，即ml/kg或ml/g計(jì)。這是因?yàn)槌赡陮?shí)驗(yàn)動(dòng)物的胃容量與體重之間有一定的比例。按單位體重計(jì)算灌胃液的體積，受試化合物的吸收速度相對(duì)較為穩(wěn)定。小鼠一次灌胃體積在0.2~1.0ml/只或0.1~0.5ml/10g體重較合適，大鼠一次灌胃體積不超過(guò)5ml/只(通常用0.5~1.0ml/100g體重)，家兔不超過(guò)10ml/2kg體重，狗不超過(guò)50ml/10kg體重。